G418溶液(50mg/ml)
G418 Solution(50mg/ml)
● 產(chǎn)品包裝：
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產(chǎn)品編號
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產(chǎn)品名稱
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產(chǎn)品包裝
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說明書
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GM34581S
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G418溶液(50mg/ml)
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20 ml
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1份
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● 產(chǎn)品簡介：
G418是一種氨基糖苷類抗生素（MW: 692.71，Molecular formula: C20H40N4O10?2H2SO4，CAS: 108321-42-2），在細(xì)菌，酵母，原生動物，高等植物及哺乳動物這類原核或真核細(xì)胞中抑制蛋白合成，廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)化了含抗新霉素基因質(zhì)粒的真核細(xì)胞的篩選。G418通過抑制轉(zhuǎn)座子Tn601，Tn5 的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成，對原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生毒素。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后，則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA，從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶（NPT）的高效表達(dá)，使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性，已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。
由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同，而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定G418的最佳篩選濃度。具體如下：將細(xì)胞稀釋到1000個細(xì)胞/ml，在100μg/ml-1mg/ml的G418濃度范圍內(nèi)進(jìn)行篩選，選擇出在10~14天內(nèi)使細(xì)胞全部死亡的最低G418濃度來進(jìn)行下一步的篩選試驗。
G418溶液已經(jīng)0.22μm抽濾除菌，可以直接使用。
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細(xì)胞系或機體
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G418推薦濃度（μg/ml）
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中國倉鼠卵巢細(xì)胞
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700-800
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Madin-Darby犬腎細(xì)胞
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500
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人上皮A431細(xì)胞
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400
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猿CV-1細(xì)胞
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500
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盤基網(wǎng)柄菌屬
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10-35
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植物
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10
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酵母
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125-500
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● 保存條件：
4-8℃保存，濕冰運輸。有效期2年。
● References
1. Loebenberg, D., et
al., G 418, a new micrommomospora-produced aminglycoside with activity
apainst protozoa and helminths: antiparasitic activity. Antimicrob. Agents Chemother., 7, 811 (1975).