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G418溶液50mg/ml

G418溶液50mg/ml

產(chǎn)品編號:GM34581S

產(chǎn)品規(guī)格:20ml

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價格 ¥300

G418溶液(50mg/ml)

G418 Solution(50mg/ml)

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產(chǎn)品編號

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產(chǎn)品包裝

說明書

GM34581S

G418溶液(50mg/ml)

20 ml

1

產(chǎn)品簡介:

G418是一種氨基糖苷類抗生素(MW: 692.71,Molecular formula: C20H40N4O10?2H2SO4,CAS: 108321-42-2),在細(xì)菌,酵母,原生動物,高等植物及哺乳動物這類原核或真核細(xì)胞中抑制蛋白合成,廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)化了含抗新霉素基因質(zhì)粒的真核細(xì)胞的篩選。G418通過抑制轉(zhuǎn)座子Tn601,Tn5 的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生毒素。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶(NPT)的高效表達(dá),使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。

由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同,而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定G418的最佳篩選濃度。具體如下:將細(xì)胞稀釋到1000個細(xì)胞/ml,在100μg/ml-1mg/ml的G418濃度范圍內(nèi)進(jìn)行篩選,選擇出在10~14天內(nèi)使細(xì)胞全部死亡的最低G418濃度來進(jìn)行下一步的篩選試驗。

G418溶液已經(jīng)0.22μm抽濾除菌,可以直接使用。

細(xì)胞系或機體

G418推薦濃度(μg/ml

中國倉鼠卵巢細(xì)胞

700-800

Madin-Darby犬腎細(xì)胞

500

人上皮A431細(xì)胞

400

CV-1細(xì)胞

500

盤基網(wǎng)柄菌屬

10-35

植物

10

酵母

125-500

保存條件:

    4-8保存,濕冰運輸。有效期2年。

● References

1. Loebenberg, D., et al., G 418, a new micrommomospora-produced aminglycoside with activity apainst protozoa and helminths: antiparasitic activity. Antimicrob. Agents Chemother., 7, 811 (1975).



 
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